過氧化氫含量（H2O2）試劑盒現貨供應，過氧化氫測試盒

過氧化氫（hydrogen peroxide），化學式H2O2。純過氧化氫是淡藍色的黏稠液體，可任意比例與水混溶，是一種強氧化劑，水溶液俗稱雙氧水，為無色透明液體。其水溶液適用于醫用傷口消毒及環境消毒和食品消毒。在一般情況下會緩慢分解成水和氧氣，但分解速度極其慢，加快其反應速度的辦法是加入催化劑——二氧化錳等或用短波射線照射。

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過氧化氫含量（H2O2）試劑盒說明書

規格：100 管/96 樣
試劑的組成和配制：
試劑一：丙酮 100mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 3mL 濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑 4℃保
存；(溶解時間較長，約 30min，務必提前準備)
試劑三：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體 30mL×1 瓶，4℃保存；

過氧化氫含量（H2O2）試劑盒現貨供應，過氧化氫測試盒

產品說明：
H2O2 是生物體內zui常見的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化產生，由 CAT 和 POD
等催化降解。H2O2 不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉化的樞紐。一方面，H2O2 可以
直接或間接地氧化細胞內核酸，蛋白質等生物大分子，并使細胞膜遭受損害，從而加速細胞的衰老
和解體；另一方面 H2O2 也是許多氧化應急反應中的關鍵調節因子。
H2O2 與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復合物，在 415nm 有特征吸收。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、丙酮 100mL、
濃鹽酸 5mL、研缽和冰。
操作步驟：
一、 H2O2 提取：
1. 細菌或細胞樣品的制備：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10
4
個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一），
超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；用試
劑一定容至 1mL；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2. 組織樣品的制備：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組
織，加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿；轉移至 EP 管中，用試劑一定容至 1mL，8000g 4℃離
心 10min，取上清，置冰上待測。
3. 血清（漿）樣品：直接檢測。
二、 測定步驟
1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 415nm，蒸餾水調零。
2、 將試劑二、三和四 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。
3、在 EP 管中按順序加入下列試劑
第 2頁，共 2 頁
試劑名稱（μL） 測定 對照
樣本 250
試劑一 250
試劑二 25 25
試劑三 50 50
4000g，25℃離心 10min，棄上清，留沉淀
試劑四 250 250
加入試劑四溶解沉淀后，室溫靜置 5min，取 200μL 轉移至微量石英比色皿或 96 孔板中測定
415nm 處吸光值 A。對照管只要做一次即可。計算 ΔA＝A 測定-A 對照。
注意事項：
1. 由于試劑一易揮發，試劑一必須先預冷再加，研磨時必須在冰上研磨。
2. 本試劑盒中試劑的揮發性較高，請帶一次性手套和口罩。
三、 H2O2 含量計算：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標準條件下測定的回歸曲線， y = 0.062x - 0.08 (x 為標準品濃度，μmol/ mL；y 為 ΔA)。
2、血清（漿）中 H2O2 含量的計算：
H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.062=16.13×(ΔA＋0.08)
3、細菌、細胞或動物組織中 H2O2 含量計算
（1）按照蛋白濃度計算
H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(V1×Cpr)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷Cpr
需要另外測定，建議使用本公司 BCA 蛋白質含量測定試劑盒。
（2）按照樣本質量計算
H2O2 含量(μmol/g 鮮重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(W ×V1÷V2)=16.13×(ΔA＋0.08) ÷W
(3 ) 按照細菌或細胞密度計算：
H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.062×V1]÷(500×V1÷V2)=0.032×(ΔA＋0.08)
V1：加入反應體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質濃
度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細胞或細菌總數，500 萬。
b. 用 96 孔板測定 的計算公式如下
1、標準條件下測定的回歸曲線， y = 0.031x - 0.08 (x 為標準品濃度，μmol/ mL；y 為 ΔA)。
2、血清（漿）中 H2O2 含量的計算：
H2O2 含量（μmol/mL）＝(ΔA＋0.08)÷0.031=32.26×(ΔA＋0.08)
3、細菌、細胞或動物組織中 H2O2 含量計算
（1）按照蛋白濃度計算
H2O2 含量(μmol/mg prot)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(V1×Cpr)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷Cpr
需要另外測定，建議使用本公司 BCA 蛋白質含量測定試劑盒。
（2）按照樣本質量計算
H2O2 含量(μmol/g 鮮重)=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(W ×V1÷V2)=32.26×(ΔA＋0.08) ÷W
(3 ) 按照細菌或細胞密度計算：
H2O2 含量(μmol/10 )=[(ΔA＋0.08) ÷0.031×V1]÷(500×V1÷V2)=0.064×(ΔA＋0.08)
V1：加入反應體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質濃
度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細胞或細菌總數，500 萬。
注意：zui低檢測限為 1μmol/mL 或 1μmol/g 鮮重或 10nmol/mg prot

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