DNS試劑-(Ghose法)

【產品名稱】：DNS試劑(Ghose法)                           

【產品規格】：500ml                         

【儲存條件】：2-8℃

【有效期】：12個月

【產品簡介】：

Ghose法DNS試劑。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物。在一定范圍內，還原糖的量與棕紅色產物的顏色深淺程度呈一定比例關系。在540nm處測定棕紅色物質的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關系。

DNS試劑（Ghose法）是一種可用于物質中還原糖含量測定的試劑，由苯-酚、氫氧化鈉、酒石酸鉀鈉、亞硫酸鈉和3，5-二硝基水楊酸組成。 

【操作步驟】(僅供參考)： 

1、 還原糖的提取：

①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器。

②50℃水浴30min，并不時攪拌，以便還原糖浸出。

③將沉淀和浸出液轉移至50ml離心管，4000g離心5min。

④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。

⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測液。

2、 總糖的水解和提取：

①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉移至該容器。

②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時攪拌。

③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液，檢查水解，如已經水解則不顯示藍色。

④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4左右，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min或過濾，獲得上清或濾液。

⑤取上清或濾液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取1ml總糖水解液，測定其還原糖的含量。

【注意事項】：

1、 該試劑避免反復凍融，以免失效或效率下降，盡量避光保存。

2、 稀釋鹽酸和氫氧化鈉溶液時，應小心操作，避免傷人。

3、 一般市售的濃鹽酸摩爾數約為11.6M，應稀釋至6M后使用。

4、 待測樣本如不能及時測定，應置于2~8℃保存，3天內穩定。

5、 如果樣品還原糖濃度過高，應用蒸餾水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。

6、 總糖計算公式在測定干擾雜質很少、還原糖含量相對總糖含量很少時使用，×0.9是為了從測定出的總糖水解成單糖中，扣除水解時所消耗的水量。

DNS試劑-(Ghose法)